silymarin çıkarma işlemi
Silymarin, birçok farmakolojik aktivite sergileyen flavonolignanların bir karışımı, süt devedikeni meyvelerinden elde edilir (Silybum marianum L. Gaertner). Geğirme meyvelerindeki yüksek lipit içeriği nedeniyle, Avrupa Farmakopesi ekstraksiyonunun iki adımlı bir sürecini önerir. İlk olarak, meyveler n-heksam kullanılarak 6 saat boyunca karalanır; ikinci olarak, silymarin 5 saat daha metanol ile çıkarılır.
Sunulan veriler, bu son derece uzun geleneksel Soxhlet ekstraksiyon işleminin basınçlı sıvı ekstraksiyonu (PLE) kullanılarak birkaç dakikaya kısaltılabileceğini göstermektedir. PLE ayrıca geleneksel prosedürde gerekli olan hakaret aşamasını ortadan kaldırmaya izin verir, böylece silymarin ekstraksiyon prosedürünü basitleştirir ve karalamanın neden olduğu silymarin kaybını önler. Optimize edilmiş ekstraksiyon koşullarında elde edilen PLE geri kazanımları, Farmakopoeia tarafından önerilen Soxhlet ekstraksiyon prosedürü tarafından elde edilenlerden açıkça daha iyidir.
Asetondaki silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, izosilybin A ve izosilybin B'nin PLE verimleri, karalanmayan meyvelerin sırasıyla 3.3, 6.9, 3.3, 5.1, 2.6 ve 1.5 mg/g'dır. Karalanmış meyvelerde metanol ile 5-h Soxhlet ekstraksiyonu, 125 ° C'de 10 dakikalık PLE'de elde edilen silymarin miktarının sadece% 72'∼ verir.
Silybum nedir?
Silybum marianum L. Gaertner, genelliklesüt turşusu, kutsanmış süt devedikeni, Marian Thistle, Mary Thistle veya Saint Mary's Thistle, Asteraceae ailesinden yıllık veya iki yılda bir elde edilen bir bitkidir. Aslen Güney Avrupa ve Asya'da yetişen bitki günümüzde tüm dünyada bulunmaktadır (1). Bu zahmetli ot şu anda tıbbi bir bitki olarak yetiştirilmektedir ve Avrupa'nın en önemli şifalı ürünlerinden biridir.
Süt turşusu 2000 yılı aşkın bir süredir tıbbi amaçlar için, en yaygın olarak karaciğer hastalığının (siroz ve hepatit) tedavisi ve karaciğerin toksik maddelerden korunması için kullanılmaktadır (2-5). Bu bitkiye olan son araştırma ilgisi, son derece yüksek antitümör aktivitesini gösteren çalışmalarla uyarılmıştır. Bitkiden elde edilen özler artık kanserin deneysel kemoprevenasyonunda ve kemoterapi yan etkilerinin iyileştiricisinde yoğun bir çalışma altındadır (6). Son raporlar, bu bitkiden elde edilen özlerin antienflamatuar ve antifibrotik etkiler gibi diğer birçok farmakolojik aktivite ile de karakterize edildiğini göstermiştir (2, 7, 8).
Birçok farmakolojik aktivite sergileyen flavonolignanların bir karışımı olan Silymarin, süt devedikeni tohumlarından (Silybum marianum L. Gaertner) elde edilir. Silymarin ekstraksiyonu için şimdiye kadar kullanılan yaygın prosedürler esas olarak yavaş yüksek sıcaklık çözücü ekstraksiyon yöntemlerine dayanmaktadır. Bu tekniklerle ilişkili dezavantajlar, ek olarak geliştirebilecek yeni alternatif çıkarma işlemlerinin aranmasına yol açmıştır.silymarin özleriKalite. İkincisi silymarin uygulaması açısından özellikle önemlidir. Elde edilen silymarin özleri, aslında, tüketici kabul edilebilirliğini karşılamak için çıkarılması gereken toksik organik kalıntılar içerebilir.
Silymarin ekstraksiyon sürecini iyileştirmek ve daha etkili ve çevre dostu hale getirmek amacıyla, son zamanlarda mikrodalga destekli solvent ekstraksiyonu, ultrason destekli çözücü ekstraksiyonu, basınçlı sıvı ekstraksiyonu, enzim destekli ekstraksiyon, süper kritik sıvı ekstraksiyonu ve özellikle basınçlı sıcak su ekstraksiyon yöntemleri olarak da bilinen subkritik su ekstraksiyonu geliştirilmiş ve uygulanmıştır.
Malzeme ve Yöntemler
Bitki malzemesi
S. marianum L. Gaertner'in kurutulmuş meyveleri 2011 sonbaharında yerel bir eczaneden (Lublin, Polonya) satın alındı. Bitki malzemesinin yeterince büyük bir temsili örneği (yaklaşık 500 g) öğütülmüş ve 0,4 mm partikül boyutunu elde etmek için elenmiştir. Ekstraksiyonlar için malzemenin hassas tartılmış kısımları kullanılmıştır.
Malzemeler ve reaktifler
Standart olarak uygulanan S. marianum L. Gaertner ve silybin B'nin (%98 saflıkta) standartlaştırılmış kuru özü Polonya'nın Sigma-Aldrich kentinden satın alındı. Aseton, etil asetat, fosforik asit, n-heksan (hepsi analitik reaktif sınıfı) ve metanol (analitik reaktif sınıfı ve HPLC sınıfı) Polonya Kimya Fabrikası'ndan (POCh, Gliwice, Polonya) satın alındı. Su, Millipore'dan (Millipore, Bedford, MA, ABD) bir Milli-Q sistemi kullanılarak arıtıldı. Yerel cam işlerinden (fraksiyon 0.4–0.6 mm) hediye olarak elde edilen nötr cam, PLE hücresinde bir dispersiyon maddesi olarak uygulandı.
Basınçlı sıvı ekstraksiyonu
PLE bir Dionex ASE200 enstrümanı (Dionex Corp., Sunnyvale, CA, ABD) ile gerçekleştirildi. Tesis malzemesi (0,5 g) inert malzeme (nötr cam) ile karıştırıldı ve altta filtre kağıdı içeren 22 mL paslanmaz çelik ekstraksiyon hücresine yerleştirildi. Ekstraksiyon hücresinin üstüne başka bir filtre kağıdı çemberi yerleştirildi. Son olarak, hücre sıkıca kapatıldı ve ısıtma fırınına yerleştirildi.
Hücrenin içeriği 60 bar çalışma basıncında çıkarıldı. İşlemin sonunda, çıkarılan numune, ekstraksiyon hücresinin% 60'ına eşit çözücü hacmi kullanılarak yıkandı. Son olarak, numune basınçlı azot (150 psi.) uygulanarak 60 s için temizlendi ve ekstrakt Teflon kaplı kauçuk kapaklı 60 mL'lik bir cam şişeye toplandı. Toplanan özün hacmi, ekstraksiyon hücresinin ambalaj yoğunluğuna bağlı olarak 25 ila 31 mL arasındaydı. Elde edilen ekstrakt 50 mL hacimsel bir şişeye aktarıldı ve uygun bir çözücü tipi kullanılarak hacmine kadar dolduruldu. Aynı koşullarda üç bağımsız ekstraksiyon gerçekleştirildi. Çalıştırmalar arasında, sistem uygun bir ekstraksiyon çözücü ile yıkandı.
Çalışma aşamasındaki PLE parametreleri solvent tipi (metanol, aseton ve etil asetat), sıcaklık (50, 75, 100, 125 ve 150°C), zaman (5, 10, 15 ve 20 dk) ve ekstraksiyon döngüsü sayısı (1-5) olarak belirlendi. PLE hakaret işlemi için solvent olarak n-heksan uygulandı ve incelen parametreler sıcaklık (50 ve 100°C) ve lipitlerin çıkarılma süresi (5 ve 10 dk) idi. Aseton ve etil asetat özleri vakum altında kurumaya buharlaştırıldı ve kromatografik analizden önce metanolde yeniden çözüldü.
Soxhlet ekstraksiyonu
Soxhlet aparatında kapsamlı ekstraksiyonlar malzemenin 2.0 g'lı kısımları kullanılarak gerçekleştirildi. Hassas tartılmış numuneler bir kağıt thimble'a aktarıldı. Yüklenen yüksük 100 mL Soxhlet çıkarıcıya yerleştirildi. Ekstraksiyonlar iki aşamalı işlemde gerçekleştirildi (n = 3). Prosedürün ilk adımında, bitki malzemesi 75 mL n-heksam kullanılarak 6 saat boyunca karalandı. İkincisinde, silymarin 75 mL metanol ile 5 saat boyunca çıkarıldı. Oda sıcaklığına soğutulduktan sonra, elde edilen ekstrakt, daha sonra hacmine metanol ile doldurulan 100 mL hacimsel bir şişeye aktarıldı. Üç bağımsız ekstraksiyon yapıldı.
Özlerin kromatografik analizi
HPLC ölçümleri, 10-μL numune döngüsü, degrade pompa (GP50), absorbans dedektörü (AD25) ve fotodiyot dizi dedektörü (PDA100) ile donatılmış bir PEEK otomatik enjeksiyon valfi içeren bir kromatografi muhafazası (LC20) içeren bir Dionex Sıvı Kromatografı (Dionex Corp.) üzerinde gerçekleştirildi. Tüm kromatografik sistem PeakNet6 veri toplama sisteminin kontrolü altındaydı. Kromatografik ayrımlar 40°C'de Prodigy ODS-2 sütunu (5 μm, 250 × 4,6 mm, ID) (Fenomen, Torrance, CA, ABD) kullanılarak gerçekleştirildi. Mobil faz A, 100 mL çözeltide %75 fosforik asitin 0,5 mL'sini içeren sulu fosforik asit çözeltisi ile metanol karışımıydı (35 : 65, v/v). Mobil faz B, 100 mL çözeltide %75 fosforik asitin 0,5 mL'sini içeren sulu fosforik asit çözeltisi ile metanol karışımıydı (50 : 50, v/v). Akış hızı 0.8 mL/dk idi. Analizler, A'daki B yüzdesi aşağıdaki gibi değişen bir mobil faz gradyanı içinde gerçekleştirildi: başlangıç konsantrasyonu, % 0 B; 28 dk, %100 B; 35 dk, %100 B, 36 dk %0 B. Bir sonraki analizden önce, sütun 20 dakika boyunca%0 B içeren mobil faz kullanılarak dengelendi. Her ekstrakt üç kez HPLC ile analiz edildi. Flavonolignanları tespit etmek için dalga boyu 288 nm olarak belirlendi ve 210 ila 500 nm arasında UV-Vis spektrumu da tepe karakterizasyonu için kaydedildi.
Özlerin nitel analizi, standartlaştırılmış kuru silymarin örneğine göre piklerin tutma süreleri ve özlerdeki UV-Vis spektrumları karşılaştırılarak gerçekleştirildi. Standartlaştırılmış kuru silymarin çözeltisini hazırlamak için, numunenin 5.0 mg silybin A + B içeren 0.02 g'lık bir kısmı 50 mL metanolde çözüldü. Silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, izosilybin A ve B için zirveler sırasıyla 15.1, 17.4, 27.5, 29.1, 33.6 ve 34.8 dk tutma sürelerinde ortaya çıktı. Nicel analiz silybin B standardına dayandırıldı ve dış standart yöntemi kullanıldı. 0.1–1.0 mg/mL konsantrasyon aralığındaki bileşiğin beş konsantrasyonundan kalibrasyon eğrisi oluşturuldu. Her standart çözelti konsantrasyonu için üç pik alan ölçümü yapıldı. Elde edilen kalibrasyon eğrisinin karakteristik parametreleri aşağıdaki gibidir: eğim, 0.516 ve kesme, 0.003. Kalibrasyon eğrisinin test edilen konsantrasyon aralığında doğrusal olduğu bulunmuştur. Korelasyon katsayısının 0.995 > olduğu tespit edildi. Silychristin, silydianin, silybin A, izosilybin A ve B standartlarını satın almanın zorluğu nedeniyle, bu bileşiklerin miktarları kromatografik yanıtları silybin B için kalibrasyon eğrisine ilişkilendirilerek hesaplanmıştır.
İstatistiksel analiz
Tüm veriler ortalama ± standart sapma (SD) olarak ifade edilir. Ple koşullarının silymarin verimi üzerindeki etkisini değerlendirmek için varyans (ANOVA) ve F testinin analizi kullanılmıştır. Karşılaştırılan parametrelerin sonucu P = 0.05 önem düzeyinde farklı olduğunda ortalama değerler önemli ölçüde farklı olarak kabul edildi. Her Fisher katsayısının önemini kontrol etmek için P değerleri kullanılmıştır.
Sonuç -ları
Şekil 1a, S. marianum L. Gaertner meyvelerinden elde edilen tipik PLE ekstresi kromatogramını sunarken, Şekil 1b, S. marianum L. Gaertner'in standartlaştırılmış kuru ekstresini metanolde (1 mg/ mL) eriterek hazırlanan süt devedikeni çözeltisinden silymarin ekstraksiyon kromatogramını gösterir. Ple veya Soxhlet özlerinin kromatogramlarının standartlaştırılmış çözelti (tutma süreleri, UV-Vis spektrum ve tepe saflık indeksi) için kromatogramlarının analizi, uygulanan kromatografik koşulların incelenen bileşiklerin, 1 ila 6 arasında numaralandırılmış tepelerin örnek matris bileşenlerinden yeterli bir şekilde çözülmesini sağladığını kanıtlamıştır. Zirveler sırasıyla: (1) silikristin, (2) silydianin, (3) silybin A, (4) silybin B, (5) izosilybin A ve (6) izosilybin B olarak tanımlanmıştır.
Süt yelesi nasıl çıkarılır?
Çoğu bitkinin aksine, süt turşusu tohumları suda çok iyi özümsemez, bu yüzden onlardan bir fincan çay yapmaya çalışmayın! Bunun yerine taze öğütülmüş tohumları yiyin veya kaliteli bir kapsül alın. Tohumları kullanıyorsanız, onları bütün olarak satın alın ve sonra gerektiği gibi öğütün (kaba bir toz haline getirmek için bir kahve değirmeni kullanıyorum). Tohumların tadı yağlı, tatlı ve acıdır - belki de edinilmiş bir tattır, ancak hiç de hoş değildir. Yemeğinize günde 1/2 ila 1 çorba kaşığı serpiştirerek başlayın ve ihtiyacınız olan miktarı ayarlayarak size nasıl hissettirdiğini görün.
Malzemeler
1 bardak ılık su
1 bardak 100 kanıt alkol votka kullanıyorum
Mümkünse 3/4 ila 1 bardak sütük tohumu öğütülür
Talimat -ları
Kullanılan Mason kavanozu yaklaşık 10 dakika kaynar suya yerleştirerek veya 15 dakika boyunca yaklaşık 250 derecede fırında rafa yerleştirerek sterilize edin.
Tüm malzemeleri bir Mason kavanozuna dökün.
Kavanoza yeni bir kapak yerleştirin ve bir halka ile sıkıca yerine vidalayın.
Kavanozu yaklaşık 1 dakika kuvvetlice çalkalayın.
Kavanozu beş hafta boyunca serin ve karanlık bir yere koyun.
Süt bükme tohumlarının üste yüzmemesini sağlamak için kavanozu günlük olarak sallayın ve alkol ve su ile tamamen aşılanır.
Belirlenen hafta sayısının sonunda, sütü sıvıdan ince bir ağ süzgecinden uzaklaştırın - sıvıyı saklayın. İnce bir örgü süzgeçiniz yoksa, açıklıkların boyutunu azaltmak için küçük bir kevgir kullanın ve / veya birkaç kahve filtresi ile bir kevgir hizaleyin.
Süt yelesi ne kadar süre etkisini göstermeye devam etti?
Süt turşusu tohumu karaciğer hücrelerini toksik kimyasallardan ve ilaçlardan koruyabilir. Ayrıca kan şekeri düşürücü, antioksidan ve antienflamatuar etkileri var gibi görünüyor.
Oksidatif stres parametrelerindeki iyileşme, özel bir süt turşusu dağıtım sistemi ile altı aylık tedavi süresince sürekli olarak kaydedildi (2). Oksidatif stres paternlerindeki iyileşme, insülin sinyalinin ve karaciğer hücresinin çalışmasında iyileşmeden sorumludur.
Süt turşusu ne kadar süre alınmalıdır? (Süt turşusu DOSAGE)
Süt turşusu, 41 aya kadar bölünmüş dozlarda ağızdan 420 mg / gün dozlarda güvenli olarak kabul edilir. Bir kaynak dispepsi ve safra sisteminin bozuklukları için günlük 12 ila 15 g kuru meyve dozları önerirken, 200 ila 400 mg / gün silymarin içeren bir ekstrakt çeşitli karaciğer rahatsızlıklarında etkili olarak kabul edilir.
Süt Turşusu Faydaları
1. Karaciğer sağlığını destekler
Süt turşusunun en yaygın kullanımlarından biri karaciğer problemlerini tedavi etmektir. 2016'da yapılan bir çalışmada, süt turşusunda farelerde diyet kaynaklı karaciğer hasarının iyileştirildiği bulunmuştur. Süt yelesinin insan karaciğerlerine aynı şekilde fayda sağladığını kanıtlamak için daha fazla kanıta ihtiyaç vardır. Ancak, araştırmacılar öyle olduğunu teori eder. Süt devedikeni silymarin'deki aktif bileşen, serbest radikal üretimini azaltarak bir antioksidan görevi görür. Bilim adamları bunun detoksifiye edici bir etki yarattığını düşünüyor, bu yüzden süt turşusu karaciğer sorunları için faydalı olabilir.
Bununla birlikte, daha fazla araştırma yapılana kadar, karaciğer sorunları için birincil tedavi seçeneği olarak süt turşusu önerilmez. Ancak denemek için yararlı bir tamamlayıcı tedavi olabilir.
2. Cilt sağlığını teşvik eder
Süt turşusu yağı cilt sağlığını iyileştirmek için topiksel olarak kullanılabilir.
Süt turşusu sağlıklı cildi teşvik etmeye yardımcı olabilir. 2015 yılında yapılan bir çalışma, süt turşusunun farelerin cildine uygulandığında enflamatuar cilt koşullarını iyileştirmeye yardımcı olduğunu buldu.
Süt turşusunda ayrıca başka bir çalışmada laboratuvar ortamında insan cilt hücreleri üzerinde antioksidan ve yaşlanma karşıtı etkileri olduğu bulunmuştur.
Bir kişinin cildine süt yelesi uygulanmasından ne gibi faydalar bekleyebileceğini belirlemek için insanlar üzerinde daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.
3. Kolesterolü azaltır
Yüksek kolesterol kalp sağlığı ile ilgili sorunlara yol açabilir ve kişinin inme şansını artırabilir.
2006'da yapılan bir çalışma, süt turşusünün kolesterol seviyelerini düşük tutarak önemli bir rol oynayabileceğini öne sürmemektedir. Diyabeti tedavi etmek için süt turşusu alan kişilerde kolesterol seviyelerinin plasebo alanlara göre daha düşük olduğunu buldu.
4. Kilo kaybını destekler
2016 yılında yapılan ilk hayvan araştırmaları, silymarin'in kilo alımına neden olan bir diyetle beslenen farelerde kilo kaybına neden olduğunu buldu.
Bu, süt turşuslarının kilo vermek isteyenler için yararlı olabileceğini göstermektedir. Bununla birlikte, bunu doğrulamak için süt turşusunun insanlarda kilo kaybı üzerindeki etkileri hakkında daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.
5. İnsülin direncini azaltır
Fareler üzerinde yapılan bir çalışmada süt bükülmüş ekstresinin insülin direncini azaltmaya yardımcı olduğu bulunmuştur. İnsülin direnci tip 2 diyabetli insanlar için bir sorundur.
Bu araştırma süt turşusuna diyabet yönetiminde rol oynayabileceğini düşündürse de, süt turşusuna insülin direncini azaltıp azaltmadığını ve diyabet yönetimini destekleyip desteklemediğini doğrulamak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.
6. Alerjik astım semptomlarını iyileştirir
Süt baştan çıkarmaktaki aktif bileşen iltihabı azaltmaya yardımcı olabilir. 2012 yılında yapılan bir çalışma, silymarin'in alerjik astımlı farelerin hava yollarındaki iltihaplanmaya karşı korunmaya yardımcı olduğunu buldu.
Silymarin'in insanlarda astım semptomlarına fayda sağlayıp sağlamadığını görmek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.
7. Kanserin yayılmasını sınırlar
Süt turşusu bazı kanser türlerinin yayılmasını durdurmaya yardımcı olabilir. 2016 yılında yapılan bir incelemede süt turşusu ekstresinin kolorektal kanserde kanserli hücrelerin büyümesini engellediği bulunmuştur.
Süt turşuslarının kanserle savaşmaya yardımcı olmak için nasıl kullanılabileceğini belirlemek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.
8. Kemik sağlığını destekler
Süt bükme çayı östrojen eksikliğinden kaynaklanan kemik kaybını önlemeye yardımcı olabilir. Süt turşusu kemik sağlığını desteklemede önemli bir rol oynayabilir. 2013 yılında yapılan bir çalışmada süt bükmenin kemik kaybını önlemeye yardımcı olduğu bulunmuştur. Çalışma özellikle östrojen eksikliğinin neden olduğu kemik kaybına baktı. Süt yeleği farklı bir nedene sahip kemik kaybı için eşit derecede faydalı olup olmadığı henüz belli değildir. Süt yeleği insanlarda kemik sağlığını desteklediği sonucuna varmadan önce daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
9. Bilişi geliştirir
2015 yılında yapılan bir çalışmada süt turşuslarının oksidatif strese karşı direnci artırdığı bulunmuştur. Oksidatif stres Alzheimer hastalığının potansiyel bir nedenidir.
Bu şekilde, süt turşusu bilişi iyileştirmeye ve zihni etkileyen dejeneratif durumları tedaviye yardımcı olabilir. Süt turşusunun biliş üzerindeki etkilerini doğrulamak için insanlar üzerinde daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.
10. Bağışıklık sistemini güçlendirir
Süt turşusu, bir kişinin bağışıklık tepkisini güçlendirmeye ve enfeksiyonla mücadele etmelerine yardımcı olabilir.
Bir hayvan modeli üzerinde 2016 yılında yapılan bir çalışma, süt turşusu ekstresinin tüketildiğinde bağışıklığı artırdığını buldu. Daha eski bir çalışma, süt turşusu ekstresinin insanlarda bağışıklık tepkisi üzerinde olumlu bir etkisi olduğunu buldu.
Bilim adamlarının süt yeleği bir kişinin bağışıklık sistemini güçlendirdiğini kesin olarak söyleyebilmesi için insan katılımcılarla daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
Süt turşusu yan etkileri
Süt turşusu, birkaç yıl boyunca alındığında bile birkaç yan etkiye sahip gibi görünmektedir. Bazı insanlarda mide bulantısı, ishal, kaşıntı ve şişkinlik vardır.
Toplu sütük tozu için lütfen bize ulaşınherbext@undersun.com.cn
Kaynaklar:https://academic.oup.com/chromsci/article/53/2/366/307144
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128093801000152
https://www.cambridgenaturals.com/blog/milk-thistle-food-for-the-liver
https://www.survivalsullivan.com/milk-thistle-extract/
https://www.webmd.com/digestive-disorders/milk-thistle-benefits-and-side-effects
https://www.medicalnewstoday.com/articles/320362#how-to-use-milk-thistle
